非洲猪瘟疫情严重影响了我国的生猪生产和肉食供应,造成了养猪行业的极大灾难。纵其原因,虽然众说纷纭,但检测方法的失当是导致疫情泛滥的重要原因之一。
国际上通用的非洲猪瘟血液学检测方法是完全错误的,采血过程的污染程度是不可估量的,检测操作过程是极其危险的,同时血液学检测结果也是严重滞后的。

非洲猪瘟病毒的感染分为两个重要阶段:局部感染和全身感染。
前者主要发生在口腔等咽喉部位(有时鼻腔也会被污染),后者则形成严重的病毒血症。这两个阶段并不是缺一不可的,多数猪群往往仅仅发生局部感染。若饲养管理方法不科学,则最终形成全身感染,发生严重的非洲猪瘟临床症状。通过加强管理,将感染限制在局部感染阶段是实现安全生产的重要保证。
口腔内局部感染阶段也是非洲猪瘟窗口期检测的重要时机,是实现传染病控制原则“早、快、严、小”的重要保证。
探索非洲猪瘟唾液学检测方法具有重要的科学指导意义和生产实践意义。

1. 唾液样品采集的方法
第一步,取出样品采集袋,并放入样品采集袋置于栏内猪只容易接触到的地方,样品采集袋与采样猪只肩部同高,不可放在容易被污染的如猪只饮水或拉粪尿的区域,防止样品在采集过程中被直接污染。

第二步,待样品采集袋被猪只的唾液充分浸润后,然后将唾液挤出到样品收集袋内,对取样后的样品采集袋进行归集,做焚烧等的无害化处理,防止其在场区内成为新的疫病传染源。

第三步,将唾液挤出转移到样品收集管内,需要注意的是每个样品至少2ml,取样量太少不利于实验室检测的实施。


第四步,在唾液收集的过程中如果遇到杂质,如饲料、食物残渣等,必要的时候需要做好离心,2000g的离心力,进行10分钟的时间。

第五步,样品收集管要要特别注明取样猪场名称,取样栋舍以及取样日期,对之后采取精准拔牙有着至关重要的作用(唾液样品可以混合,但不宜超过5个样品,过多会影响检测的准确度)。

2. 唾液样品的保存
对采集的唾液样品在送往实验室前需要保存在冰箱内,必须在24小时内送往实验室进行检测。如果不能或是要用作后期的复检,则应将样品保存于-20至-80℃冷冻保存,并且加入核酸保护液。


3. 唾液样品采集的几点注意事项
1)对计划采集唾液样本的猪群在前晚停料不停水,间隔10-12小时采集唾液,保证唾液里面没有食物残渣,确保检测结果不受影响。

2)对母猪或公猪可以单头采集唾液,保育仔猪或育肥猪可以采集群体唾液。


3)采集完唾液,将唾液与核酸保护液按1:1,马上挤到含核酸保护液的瓶中(唾液中的酶对病毒有降解作用),之后采用冰袋运至实验室。

4)如果直接送至实验室可以2~8℃保存,用于长期之后的复检,需要-20至-80℃保存。


只有控制局部感染才有净化猪群,消除病毒携带状态的可能性。总之,非洲猪瘟是一种缓慢传播的接触性感染性疾病,从窗口期感染到全身性感染(病毒血症)需要具备一定的条件,较长的窗口期呈现也为净化非洲猪瘟提供了防控时机。其中,唾液学的非洲猪瘟病毒检测是实现早期净化的重要方法之一,建议推广使用。

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